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Plasmid Mini Kit II(50)
點(diǎn)擊次數(shù):1405 更新時(shí)間:2017-10-13

質(zhì)粒小量提取試劑盒II型Plasmid Mini Kit II(50)詳細(xì)介紹

美國Omega包含了多款系列的提取試劑盒及實(shí)驗(yàn)耗材,溶液等,包含:快速過濾超大量質(zhì)粒提取試劑盒,質(zhì)粒小量提取試劑盒I型,質(zhì)粒大量提取試劑盒,質(zhì)??焖僦辛刻崛≡噭┖?,質(zhì)??焖俅罅刻崛≡噭┖?,酵母質(zhì)粒提取試劑盒,96孔板快速過濾質(zhì)粒提取試劑盒,其他系列等,作為Omega代理商,上海遠(yuǎn)慕生物秉承信譽(yù)為生存之本的宗旨,對于產(chǎn)品的質(zhì)量上是層層把關(guān),價(jià)格上也非常實(shí)惠,訂購!

 

 

名稱:質(zhì)粒小量提取試劑盒II型

品牌:Omega

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

系列:質(zhì)粒小量提取試劑盒

貨號:D6945-01

型號:Plasmid Mini Kit II(50)

用途:從小于15ml培養(yǎng)過夜的菌液提取50-70ug高純度質(zhì)粒DNA

質(zhì)粒小量提取試劑盒II型,Plasmid Mini Kit II(50)

質(zhì)粒小量提取試劑盒II型使用范圍與技術(shù)指標(biāo):

1.適用于從菌液中提取各類高、中、低拷貝量的質(zhì)粒。

2.本試劑盒可純化長度達(dá)15kb的質(zhì)粒。

3.過夜培養(yǎng)的菌液(一般OD600>1.5),高拷貝量質(zhì)粒提取能力每毫升菌液可達(dá)4-6μg,如pUC18等;中低拷貝量質(zhì)粒每毫升菌液1-3μg,如pET系列載體。

 

 

質(zhì)粒小量提取試劑盒采用經(jīng)典的堿裂解法和硅膠柱純化方式,適合于從1.5-5.0ml培養(yǎng)過夜的大腸桿菌(DH5α, JM109)等菌液中抽提5-35µg高純度的質(zhì)粒DNA。操作者可在30分鐘內(nèi)完成多個(gè)樣品的質(zhì)粒提取工作。純化的質(zhì)??梢灾苯佑糜谧詣訙y序、限制性內(nèi)切酶酶切、PCR、標(biāo)記等實(shí)驗(yàn)。從1.5-5.0ml培養(yǎng)過夜的菌液中收集細(xì)菌后,采用經(jīng)典的堿裂解法裂解細(xì)菌,離心去除染色體DNA和蛋白質(zhì),上清液轉(zhuǎn)移至硅膠柱,離心吸附質(zhì)粒DNA,經(jīng)兩種溶液洗滌去除殘余蛋白質(zhì)和各種雜質(zhì),zui后用Elution Buffer洗脫出質(zhì)粒DNA。

 

 

Plasmid Mini Kit II(50),質(zhì)粒小量提取試劑盒II型使用流程:

*次使用時(shí),將試劑盒攜帶的RNaseA全部加入到溶液SI中,混合均勻,4°C保存。

1.取2ml菌液,8,000rpm離心1min,去除上清,收集菌體,倒盡或吸干培養(yǎng)基。(菌液較多時(shí)可以通過多次離心將菌體沉淀收集到一個(gè)離心管中,一般可多至6-10ml菌液)。

2.向留有菌體沉淀的離心管中加入150μl溶液SI(請先檢查是否已加入RNaseA),吸打或振蕩至*懸浮菌體。(如果菌塊未*混勻,會影響質(zhì)粒的得率和質(zhì)量)。

3.向離心管中加入250μl溶液SⅡ,溫和地顛倒離心管6-8次使菌體讓其裂解。(混勻一定要溫和,與之前步驟相比,此時(shí)菌液應(yīng)變得清亮粘稠,作用時(shí)間不要超過5min)。

4.向離心管中加入400μl溶液SⅢ,立即顛倒離心管6-8次,充分混勻,此時(shí)會出現(xiàn)白色沉淀。

5.12,000rpm離心5-10min。(如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上清)小心地將上清移入吸附柱中,室溫放置2分鐘,8,000rpm離心1min,倒掉收集管中的液體,將吸附柱放入同一個(gè)收集管中。(過柱后液體可進(jìn)行第2次過柱,增加回收效率)。

6.向吸附柱中加入700μl洗滌液WB(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),8,000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

7.向吸附柱中加入500μl洗滌液WB,8,000rpm離心1min,棄廢液。

8.12,000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫2-3分鐘,目的是去除吸附柱中殘余的洗滌液WB。

9.將吸附柱放入一個(gè)干凈的1.5ml收集管中,向吸附膜中央加入100-150μl EB(將EB預(yù)熱至60℃可以進(jìn)一步提高得率),室溫放置2min,12,000rpm離心1min。(為了增加質(zhì)粒的回收效率,可將收集液 EB分兩次洗脫,每次50μl加入吸附柱中,效率明顯有提升)。

 

質(zhì)粒小量提取試劑盒部分相關(guān)產(chǎn)品如下:

96孔板Swift質(zhì)粒提取試劑盒

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標(biāo)簽:Plasmid Mini Kit II(50)   質(zhì)粒小量提取試劑盒II型   質(zhì)粒小量提取試劑盒  

質(zhì)粒提取試劑盒

 
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