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ELISA試劑盒17個相關(guān)操作技巧
點擊次數(shù):762 更新時間:2017-10-17
   ELISA試劑盒17個相關(guān)操作技巧
  技術(shù)整理出了17個和ELISA試劑盒相關(guān)的操作技巧,如若您掌握了這些實驗技巧之后,在做ELISA實驗中,試驗起來會更熟練,大大的降低了實驗過程中的風(fēng)險,ELISA試劑盒實驗的入門新手掌握了這些知識后,操作起來都會快的多。
  ELISA試劑盒17個相關(guān)操作技巧如下:
  1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
  2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
  3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4.務(wù)必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
  5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
  6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
  7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
  8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
  9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
  10.人ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
  12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
  14.沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
  15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
  16.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確。
  17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
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