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總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)
點(diǎn)擊次數(shù):1613 更新時(shí)間:2017-11-13

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中文名:總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格:120T

有效期: 12個(gè)月有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。 

用途:定量檢測(cè)血清、組織樣本中總蛋白含量。

本產(chǎn)說明:酶標(biāo)儀檢測(cè)540nm處吸光值。

系列:生化檢測(cè)

適用范圍:本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)

總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)多用于人或動(dòng)物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測(cè)定。雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下,銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物,呈紫色,所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例??赏ㄟ^比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長(zhǎng)為540nm。雙縮脲法測(cè)定蛋白濃度兼容性亦很好,不受大部分樣本中其他成分的影響,但易受銅離子螯合劑影響。

 

 

總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)操作步驟:

1.取1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)中,充分溶解后配制成20mg/ml的 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。亦可按自己試驗(yàn)要求繼續(xù)進(jìn)行稀釋,如稀釋至1mg/ml。特別提示:待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測(cè)蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。

2.鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,離心,取上清待檢。

3.TP加樣操作,按下表依次加入試劑:

總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)操作步驟

4.混勻,孵育。   

5.準(zhǔn)孔和各待測(cè)孔的吸光度。  

6.當(dāng)遇到渾濁或溶血樣本等,可設(shè)”樣本空白孔”:取待測(cè)樣品加入雙縮脲空白試劑,以雙縮脲空白試劑調(diào)零,讀取樣本空白孔吸光度。用待測(cè)孔吸光度減去標(biāo)本空白孔吸光度后的凈吸光度,計(jì)算總蛋白濃度。

 

 

總蛋白檢測(cè)試劑盒(雙縮脲微板法)注意事項(xiàng):

1.蛋白標(biāo)準(zhǔn)粉末溶解于蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后,即獲得蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液,該原液中含有防腐劑, 不影響后續(xù)檢測(cè),該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長(zhǎng)期保存。  

2.待測(cè)蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后,如果發(fā)現(xiàn)檢測(cè)效果不佳,可以室溫放置1h或 60℃放置15min,顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深。  

3.測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化,可能的原因 是樣品中含有銅離子螯合劑。  

4.如果沒酶標(biāo)儀,也可以使用分光光度計(jì)測(cè)定。使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí),每個(gè) 試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。  

5.檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)所有孔都呈暗紫色,可能原因是樣品含有還原劑,應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。  

 

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