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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

葡聚糖凝膠G-200操作說明書
點(diǎn)擊次數(shù):6138 更新時(shí)間:2017-12-04

葡聚糖凝膠G-200操作說明書

 

中文名:葡聚糖凝膠G200

中文別名:交聯(lián)葡聚糖凝膠 G-200;交聯(lián)右旋糖酐凝膠 G-200

英文名:Sephadex G-200;Cross-inked dextran gel G-200

供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕

分離范圍:5000-600000

干顆粒直徑:40~120um 

分子量分級范圍:A.肽及球形蛋白質(zhì):5000~800000;B. 葡聚糖(線性分子):1000~200000 

床體積毫升/克干分子篩:30~40ml/g 

得水值:20.0±2.0 

溶脹zui少平衡時(shí)間(h):室溫72h(20℃);沸水浴5h(90℃) 

柱頭壓力(kpa)(2.5cm直徑柱):0.39~1.57 

PH:2~13 

性狀:白色珠粒,屬親水性凝膠。性穩(wěn)定,不溶于水、弱酸和堿溶液,遇強(qiáng)酸能使糖苷鍵分解。 

用途:用于凝膠過濾,肽類分離、脫鹽,分子量測定。 

保存:RT  

適用范圍:本產(chǎn)品僅供科研使用!

葡聚糖凝膠G-200操作說明書

葡聚糖凝膠G-200簡介

葡聚糖凝膠G-200,白色珠狀顆粒。一種由葡聚糖經(jīng)醚鍵相互交聯(lián)合成具有多孔性三度空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子分離材料,為穩(wěn)定的親水性凝膠,G-10是表示G類凝膠吸水量的型號??蓪后的數(shù)字除以10即為該凝膠每克干重所吸水分的毫升數(shù)。能使一定分子量范圍的大分子進(jìn)入凝膠的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)內(nèi),不溶于水、鹽 分離和提純蛋白質(zhì)、多糖、酶、核酸、激素、氨基酸、多酞和抗菌素等。薄層色譜支持物。

 

葡聚糖凝膠G-200操作流程

1.乙醇浸泡

在室溫下,將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時(shí),并不斷攪拌以保證凝膠溶脹,用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干。

2.無鹽水浸泡   

室溫下,在無鹽水中充分溶脹24小時(shí),間隙攪拌,以保證凝膠的*溶脹。

3.鹽酸浸泡    

在常溫下再用0.1M HCl浸泡12小時(shí),間隙攪拌,濾干,水洗只中性。

4.裝柱  

將溶脹好的凝膠根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi),注意保持濕態(tài)裝柱,并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。

5.平衡  

上樣前平衡層析柱至少3-5個(gè)柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值)。

6.上樣  

凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積,我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積,視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時(shí)上樣量可以達(dá)到20%的柱床體積,柱高的選擇也與分離要求相關(guān),柱高控制在40-50cm 以下,過高的凝膠層會引起較大的反壓,應(yīng)當(dāng)盡可能避免。難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制,脫鹽時(shí)高徑比為5:1即可。

7.洗脫方法      

可以用無鹽水,也可以采用上柱時(shí)的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以*分離純化。

8.清洗      

每次用完之后,將柱子里的緩沖液置換為去離子水,然后用20%的乙醇封存。

9.在位清洗(CIP)      

凝膠使用十次后作一次CIP,目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個(gè)柱體積,再以至少三個(gè)柱體積平衡緩沖液再生。

 

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標(biāo)簽:葡聚糖凝膠G-200,交聯(lián)葡聚糖凝膠 G-200,交聯(lián)右旋糖酐凝膠 G-200

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