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脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途
點擊次數(shù):1338 更新時間:2018-04-08

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脫氧核糖核酸酶Ⅰ說明

脫氧核糖核酸酶Ⅰ是zui有代表性的核酸內切酶。zui早是由M.Kunitz從胰臟中分離出結晶的,也稱為胰脫氧核糖核酸酶或DNaseⅠ, EC3.1.21.1。分子量約3.1萬,等電點pH4.7,zui適PH 7附近,需要Mg2 和Mn2 。分離單鏈和雙鏈DNA,產生具有 5′-磷酸末端的分解物。在一般條件下其分解產物含有1到8—12個寡聚核苷酸,平均大小等于四個核苷酸。反應初期似乎是先分解dpPupPy鍵,但因二價離子的存在對切斷的方式有顯著影響。因此酶容易得到結晶,所以于核酸的研究上廣泛應用;又由于對整個結構已經明確,因而也是酶化學研究的材料。

脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途

脫氧核糖核酸酶Ⅰ

 

脫氧核糖核酸酶Ⅰ用途

用于分子生物學研究。降解DNA的各種酶。這些酶使糖-磷酸酯主鏈上的磷酸二酯鍵水解。此類酶分為兩種:外切核酸酶和內切核酸酶。DNAase種類很多,有些為單鏈特異的,有的為雙鏈特異性的,或序列特異性(如限制性內切酶)。限制性核酸內切酶對特定堿基序列有識別能力,此一特性已用于基因操作技術中,以構建人工克隆。

 

脫氧核糖核酸酶Ⅰ性狀

為雙鏈特異性內切核酸酶,能降解雙鏈DNA成為具有5ˊ-磷酸及3ˊ-OH末端的寡脫氧核糖核苷酸。當有一價錳離子存在時,亦能降解單鏈DNA。溶于水,微溶于30%乙醇和丙酮。酶反應:脫氧核糖核酸→二核苷酸5′磷酸+寡聚核苷酸5′磷酸zui適pH 7.8。吸光系數(shù)(E1%280)11.1。激活劑為二價金屬離子,zui大激活可以從鎂(Mg2+)+鈣(Ca2+)得到。抑制劑有EDTA和十二烷基硫酸鈉??杉?mmol/L鈣(Ca2+)

 

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