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科研實(shí)驗(yàn)選擇原代細(xì)胞還是細(xì)胞株?
點(diǎn)擊次數(shù):333 更新時(shí)間:2023-12-08

  原代細(xì)胞:從體內(nèi)直接分離的細(xì)胞。功能、代謝、形態(tài)類(lèi)似體內(nèi)細(xì)胞的特點(diǎn),因此原代細(xì)胞適用于分析單個(gè)細(xì)胞形態(tài)、代謝、功能。原代細(xì)胞的缺點(diǎn)是:細(xì)胞均一性差,因?yàn)閺奶囟ńM織取下來(lái)的原代細(xì)胞可能處于不同的發(fā)育時(shí)期。增殖能力差、培養(yǎng)時(shí)間受限、轉(zhuǎn)染效率低。

  原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

 ?、?組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

  ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

  細(xì)胞株:細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)首ci傳代成功后即為細(xì)胞系(cell line), 由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限, 可稱(chēng)為有限細(xì)胞系(finite cell line), 如可以連續(xù)培養(yǎng), 則稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line), 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。 所以細(xì)胞株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來(lái)講,可培養(yǎng)到40-50代。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對(duì)于人類(lèi)腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱(chēng)為連續(xù)性株或系。

  原代細(xì)胞由于轉(zhuǎn)染效率低這個(gè)問(wèn)題,應(yīng)用受到了限制。自從腺病毒誕生后,因?yàn)槠鋍hao強(qiáng)的感染能力,克服了原代細(xì)胞難感染的問(wèn)題,使得原代細(xì)胞的使用變得更加簡(jiǎn)單。由于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)后,很多時(shí)候需要做到動(dòng)物體內(nèi),由于原代細(xì)胞有體內(nèi)細(xì)胞的特點(diǎn),為了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果更加趨向一致性,因此用原代細(xì)胞來(lái)進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)更值得考慮。

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