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植物病原菌分離的實驗原理和操作步驟
點擊次數(shù):56 更新時間:2025-02-28

一、實驗原理

植物患病組織內(nèi)的真菌菌絲體,如果給予適宜的環(huán)境條件,除個別種類外,一般都能恢復(fù)生長和繁殖。植物病原菌的分離就是指通過人工培養(yǎng),從染病植物組織中將病原真菌與其它雜菌相分開,并從寄主植物中分離出來,再將分離到的病原菌于適宜環(huán)境內(nèi)純化,這個過程總稱植物病菌的分離培養(yǎng)。植物病原真菌的分離一般都是采用組織分離法,就是切取小塊病組織,經(jīng)表面消毒和滅菌水洗過后,移到人工培養(yǎng)基上培養(yǎng)。

二、實驗?zāi)康?br />
植物病原菌的分離培養(yǎng)是植物病理學(xué)實驗最基本的操作技術(shù)之一,它對原害鑒定,病原形態(tài)觀察、植物病害接種體的培養(yǎng)等方面都是經(jīng)常使用的研究手段。通過本實驗,要求植物病原菌分離培養(yǎng)的一般原則和方法。

三、實驗步驟

(一)分離前的準(zhǔn)備工作:

1.工作環(huán)境的清潔和消毒

分離培養(yǎng)一般在無菌室、無菌箱或無菌工作臺(超凈工作臺)上進行,無菌室和無菌箱要經(jīng)過噴霧除塵,并用藥物或紫外線照射消毒(常用消毒du藥物為70%酒精,2%煤酚皂液,5%石tan酸液等噴霧。若用紫外線燈照射則需20-30分鐘)。在沒有上述設(shè)備條件時,在清潔房間里關(guān)閉門窗,避免空氣流動,經(jīng)過噴霧除去空氣及地面灰塵后進行操作,也可獲得較好的結(jié)果。工作前擦凈桌面,最好鋪上濕紗布。將所需用的物品按次序放在工作臺上,避免工作時走動,工作人員最好穿上滅菌后的工作服,帶上口罩,并用肥皂洗手,用70%酒精或0.1%新潔爾滅擦手。

2.分離用具的消毒

凡是和分離材料接觸的器皿(刀、剪、鑷、針等)都要隨時(至少在使用時)保持無菌,將這些用具浸于70%酒精中,使用時在燈焰上滅菌燒去酒精,如此2-3次(刀、剪、鑷等不宜在燈焰上燒時過長,以防退火)。再次使用時必須重復(fù)滅菌。培養(yǎng)皿、試驗等要經(jīng)過干熱滅菌。培養(yǎng)基及洗滌或稀釋用蒸餾水都需要事先經(jīng)過高壓蒸氣滅菌。

3.分離材料的選擇

用新發(fā)病的植株、器官或組織做為分離材料,可以減少腐生菌的污染。任何植物壞死部分的內(nèi)部或表面,都可能有腐生微生物的孽生,所以一般斑點病害應(yīng)從鄰近健全組織,即從病、健組織交界處獲得分離材料。

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