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上海遠(yuǎn)慕技術(shù)詳解:免疫血清c化抗體操作
點(diǎn)擊次數(shù):1172 更新時(shí)間:2017-01-03

    上海遠(yuǎn)慕技術(shù)詳解:免疫血qin純化抗體操作

    免疫血清(immuneserum)亦稱抗血清。含有抗體的血清制劑。種類很多,包括抗毒素、抗菌血清、抗病毒血清、抗Rh血清等。關(guān)于免疫血qin純化抗體的詳細(xì)操作步驟我公司專業(yè)技術(shù)提供專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo)。如下:

    1.剪取一小條0.45μm的硝酸纖維膜,置于1.5mleppendorf管中,浸沒(méi)于1ml1mg/ml的抗原溶液中,5min。

    2.取出膜,置于濾紙上干燥。

    3.將膜放置于裝有1mlBufferA的eppendorf管,輕輕震蕩混勻30min。

    4.移去BufferA,用新鮮的BufferA洗一次,將膜浸沒(méi)于0.8-1ml相應(yīng)的抗血清中,1-2h,于混勻器上輕輕震蕩混勻。

    5.移去血清,用PBS洗膜,4次,每次5min。

    6.洗脫抗體

    新配置100mM甘氨酸(pH2.5)抗體洗脫液,將膜置于洗液中,手輕搖混勻2min,迅速將洗液轉(zhuǎn)移至裝有100μl1MTris(pH8.0)中和,使抗體復(fù)性。第1次洗脫用400μl抗體洗脫液,第2,3次用200μl。

    7.往洗脫下來(lái)的液體中加入100μlBufferA以穩(wěn)定抗體,并分裝成30μl每管,于-20℃保存。

    注:所有步驟均在室溫完成。

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