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上海遠(yuǎn)慕詳解:ELISA實(shí)驗(yàn)必須注意的15條信息
點(diǎn)擊次數(shù):989 更新時間:2017-02-28

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在ELISA實(shí)驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的,無論是對實(shí)驗(yàn)的硬件條件還是對實(shí)驗(yàn)的操作人員的技術(shù)要求,都是如此。下面所提到的就是一些在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時所要注意15個問題。
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實(shí)驗(yàn)時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、溫浴時,要用封板膜封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
9、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1-2分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
10、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
11、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
12、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
13、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
14、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
15、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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